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NAC通过调控STAT3减轻对乙酰氨基酚诱导的氧化性肝损伤
谢彬;范克瑞;N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)是一种用于多种病因引起的痰液粘稠的祛痰剂,近来的研究显示,它还具有显著的抗氧化损伤、抗炎活性等作用,然而其分子机制仍然不是很清楚。本研究旨在探讨NAC在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的急性肝损伤中的保护效应及其具体的分子机制。本研究以APAP诱导的小鼠急性肝损伤模型作为对照,使用NAC干预该模型。结果显示NAC处理可显著下调APAP诱导的血浆天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)以及丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)表达水平,减少肝组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)的生成,抑制血浆中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与白介素-6 (interleukin-6,IL-6)的产生,提升肝组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)与还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量,以及减轻APAP导致的肝组织病理学形态异常。与此同时,NAC还能够上调血红素氧合酶-1 (heme oxygenase-1,HO-1)的蛋白水平,HO-1的表达上调抑制了信号传导与转录激活因子3 (signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的活性与表达。NAC能够减轻对乙酰氨基酚诱导的氧化性肝损伤,其作用机制可能是通过调控HO-1/STAT3信号途径而实现的。
鲟鱼鱼肠抗氧化肽的提取及抗氧化性
饶承冬;柯勤勤;郑杨杨;邓静;叶浪;杨娟;李树红;王彩霞;张志清;陈安均;刘兴艳;申光辉;吴贺君;罗擎英;黎杉姗;苏赵;李美良;探讨酶法制备具有抗氧化活性的鲟鱼鱼肠抗氧化肽的方法,并进行体外抗氧化活性的测定。结果表明,比较4种蛋白酶酶解产物的抗氧化能力,确定胃蛋白酶为制备鲟鱼鱼肠抗氧化肽的最佳水解用酶;通过单因素试验和正交实验分析得出最适酶解工艺是:胃蛋白酶加酶量3 200 U/g,酶解时间1.5 h,料液比1∶20,温度35℃。其体外抗氧化能力随肽质量浓度增大而增大,在浓度为1.5 mg/mL时,鲟鱼鱼肠抗氧化肽清除DPPH·能力达到Vc的83.64%,对·OH清除率为78.06%,还原力大小约为Vc溶液的1/3。胃蛋白酶酶解鲟鱼鱼肠制备的抗氧化肽具有较好的抗氧化活性,其作为一种潜在的商业抗氧化剂具有良好的应用前景。
念珠藻葛仙米藻蓝蛋白α与β亚基基因克隆、表达及其单体结构模拟
汪琼;王静;陈嘉蕙;李俐;程超;李伟;梅邢;田国政;方庆;天然抗氧化剂对于清除人体内自由基、保障健康具有重要作用。藻蓝蛋白(phycocyanin, PC)是蓝藻等藻类细胞内的一类特殊色素蛋白,具捕获光能的功能。体外研究发现,藻蓝蛋白具有较显著的抗氧化、抑癌细胞增殖等生物活性。试验利用食源性的拟球状念珠藻葛仙米(Nostoc sphaeroides)的基因组DNA为材料,借助PCR扩增克隆葛仙米藻蓝蛋白两个重要亚基α与β基因,Ns-PC-α和Ns-PC-β。结果表明,葛仙米基因组中,Ns-PC-α和Ns-PC-β基因编码框长度分别为492 bp和522 bp;Ns-PC-α和Ns-PC-β基因以双顺反子形式存在,Ns-PC-α位于Ns-PC-β下游。Ns-PC-α和Ns-PC-β分别编码由163与173个氨基酸组成的蛋白。Ns-PC-α和Ns-PC-β亚基蛋白多肽链中共含有3个半胱氨酸残基(Ns-PC-α的第85位与Ns-PC-β中的第83位氨基酸残基和第154位氨基酸残基),很可能是藻蓝胆素的结合位点。原核表达显示Ns-PC-α和Ns-PC-β分子量为近18 kD,Ns-PC-α比Ns-PC-β略小,与预测结果一致。模拟其高级结构,发现Ns-PC-α和Ns-PC-β单亚基均含有7个α-螺旋,除N端α-螺旋外,其它几个α-螺旋进一步折叠形成疏水核心区;并且,Ns-PC-α和Ns-PC-β结构上能够较好吻合,形成一稳定而封闭的单体,弧度近2π/3。Ns-PC-α和Ns-PC-β组成的这种单体结构是其进一步建构圆盘状三聚体Ns-PC-(α/β) 3的重要基础。本研究结果为食源性念珠藻葛仙米藻蓝蛋白抗氧化功能的进一步应用提供了重要依据。
一个水稻芒基因AWN-3的遗传分析与基因定位
沈威;谭文叶;韩悦;何娟;徐一博;黄红春;周师旭;覃宝祥;罗继景;李容柏;本研究利用无芒粳稻(Oryza sativa subsp.japonica Kato)品种‘日本晴’作为受体亲本，短芒籼稻(Oryza sativa subsp.indica Kato)品种‘9311’作为供体亲本，构建染色体片段代换系CSSL119,初步定位了一个新的芒发育相关基因AWN-3。AWN-3被定位在2号染色体分子标记M4和M5之间的1.2 Mb范围内；与‘日本晴’相比，CSSL119的平均芒长、芒着生率、二次枝梗数、穗粒数和单株产量均显著增加；RT-qPCR结果表明，与‘日本晴’相比，CSSL119中OsCKX2、An-1和An-2的表达量显著降低，而OsRR2、OsRR4、OsRR7、OsRR11和GAD1的表达量则显著增加，这表明AWN-3可能参与OsRR2、OsRR4、OsRR7、OsRR11和OsCKX2的表达而增加穗粒数，而芒发育的促进可能与GAD1表达的增加相关。本研究结果为AWN-3的基因克隆、功能分析和产量性状的遗传改良奠定了基础。
基于质谱的蛋白质N末端乙酰化程度定量方法的研究
王洁;张旭敏;随着质谱技术及各种定量方法的不断完善和发展,定量蛋白质组学的方法不断地被应用到各类生物学研究中。蛋白质组学定性定量数据的处理主要通过一些多功能的商业化或者开源软件来进行,如常用的数据分析软件Proteome Discoverer和Maxquant。但是在通过化学标记对蛋白质N末端乙酰化程度进行定量这一方面,Proteome Discoverer和Maxquant在一定程度上存在准确性不高和完整度不够的问题。于是本研究针对自己的实验特点,通过Java算法编写了相应的定量程序Acequant来完成N末端乙酰化程度的相对定量。本研究将该程序在已有相关报道的He La cell上进行了验证,Acequant共定量到1 587个蛋白质N末端,而Proteome Discoverer和Maxquant分别只定量到42个和306个N末端。同时,手动验证原始图谱也证实了Acequant定量的准确性更好。于是,本研究将此方法进一步应用到秀丽隐杆线虫N末端乙酰化的研究中,并初步发现了线虫整体的N末端乙酰化状态,为进一步的N末端研究提供了支持。
现代农业园区系统结构与特点分析
于平福,梁贤,范小俊现代农业园区的建设与发展已成为各地依靠科技进步调整农业产业结构,引导农民增收致富的有效途径。在实地考察和统计调查的基础上,分析现代农业园区的内涵、类型、系统结构、基本功能和特征,以促进现代农业园区的规范管理和健康发展。
鲜切果蔬非氯杀菌技术研究进展
刘晓燕;兰维杰;黄文部;雷丽;秦文;鲜切果蔬因其新鲜、营养和方便的特点而日益受到消费者青睐,具有广阔的发展前景。但鲜切产品在经过清洗、去皮、切分等工序后,易受微生物污染而导致其品质下降。目前应用最广的含氯杀菌剂存在诸多弊端,并已被一些欧洲国家禁止使用。因此针对鲜切产品,开发一种安全、健康、高效的新型非氯杀菌技术是近年的研究热点。研究从物理、化学、生物3方面概述了国内外对新型非氯杀菌技术在鲜切果蔬中的应用现状,旨在为非氯杀菌技术的深入探究提供参考。
基于微孔板比色法的总糖含量测定方法的建立及应用
田艳花;李石飞;李梓菁;王凯红;王永刚;采用单因素试验和响应面优化法研究了微孔板法高通量检测总糖含量的方法,并进行了方法学考察,研究了不同离子、氨基酸和蛋白质等对该方法测定的影响。并以微生物多糖、枸杞多糖、可溶性淀粉和多种单糖为试受对象,与传统在比色管中的硫酸蒽酮比色法和苯酚硫酸比色法测定结果进行了比较。结果表明,反应体系总体积为230μL,其中150μL浓硫酸,30μL 5%苯酚水溶液,在85℃水浴20 min,在此条件下,在490 nm处的光吸收值与葡萄糖浓度呈线性相关,拟合线性回归方程相关系数R2为0.994 1,线性范围为10~100 nmol/well。该方法相对标准偏差为0.4%,加标回收率在102.7%~104.10%之间。精密度试验、稳定性试验和干扰性试验进一步说明此方法简便快捷、准确可靠、干扰性小,能应用于总糖含量的高效测定。
我国罗汉果研究的文献分析
王凤珠;陈海燕;罗汉果是广西著名特产,运用文献计量学方法,对1989~2006年我国罗汉果研究的文献计量、文献来源、作者及文献内容等四个方面进行分析,从情报学角度探究我国罗汉果的研究现状及存在问题。
菘蓝CYP83A1基因的克隆、表达特性及原核表达分析
赵桂红;张妮妮;高帅帅;陆苗;王晶;张天翼;李焘;本研究对菘蓝CYP83A1基因进行了克隆、表达特性及原核表达研究。结果表明,IiCYP83A1基因组DNA全长为1 622 bp,包含2个外显子和1个内含子;cDNA全长为1 512 bp,编码503个氨基酸。IiCYP83A1编码的蛋白包含2个跨膜结构域,无信号肽,主要定位于内质网膜,属于亲水性蛋白,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,与萝卜、欧洲油菜、西兰花和芜菁等植物的CYP83A1蛋白具有较高的同源性。qRT-PCR结果表明,IiCYP83A1在不同组织中的表达具有显著性差异,表现为茎>叶>果>花和根;在幼苗期、生长期和花期的表达量显著高于萌芽期;茉莉酸甲酯(MeJA)和伤害处理能够显著促进该基因的表达,而低温(4℃)和水杨酸(SA)处理则对其表达具有一定的抑制作用。将克隆到的IiCYP83A1基因连接到表达载体pET-28a上,构建原核表达载体pET-28a-IiCYP83A1并对其进行原核表达。SDS-PAGE结果显示,在E.coli BL21中成功诱导表达了CYP83A1蛋白,与预期蛋白分子量大小一致。本研究结果可为进一步研究IiCYP83A1的功能提供实验依据。