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1.2%鱼藤酮微乳剂的研制
张庭英;曾东强;徐汉虹;江定心;张竞立;报道1.2%鱼藤酮微乳剂(M E)的制备方法。以二甲苯与乙酸乙酯(2∶3,v/v)为溶剂,CRES-LOX 3433为乳化剂,自来水为介质配制出的鱼藤酮M E,经热贮稳定性测定,各项质量指标合格;对黄曲条跳甲P hy llotreta striola ta(F abric ius)的毒力,1.2%鱼藤酮M E的LC50为503.25 m g/kg,7.5%鱼藤酮乳油(EC)的LC50值为640.22 m g/kg,M E的毒力是EC的1.27倍。
聚丙烯酰胺凝胶电泳的一种辅助辨型方法
于波;王德前;王芳;王冬蕾;卢立志;聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是实验室常用的基本鉴定方法之一。但由于做胶方式以及各实验室仪器设备良莠不齐,经过一系列纷繁复杂的操作,电泳结果未必尽如人意。其中凝胶带型的判断就是一个较为困惑的问题,一般的聚丙烯酰胺胶跑出的条带总体上都有弧度,越是靠近凝胶两侧越是严重。在本实验中,我们设计了一种较为简单易行的方案,即将难以区分的条带样品做成混合样marker来辅助辨型,通过调整电压和凝胶浓度来达到区分条带的目的。我们用该方案可以将相差0～3bp大小的条带区分开来。
响应面法优化灰色链霉菌产纤维素酶的工艺研究
李堆淑;以灰色链霉菌为原料,在单因素试验的基础上,采用响应面法试验,优化灰色链霉菌产纤维素酶活性的发酵条件。结果表明,单因素试验灰色链霉菌产纤维素酶活性的最适发酵条件:碳源为CMC-Na,氮源为明胶,温度为28℃,pH为7.0,转速为130 r/min。响应面法试验优化灰色链霉菌产纤维素酶活性最佳发酵条件为:温度27.7℃,pH值6.9,转数130.3 r/min,在此优化条件下,灰色链霉菌产纤维素平均酶活性为6.103 U/mL(n=3),与模型的预测值(6.217 U/mL)比较接近,误差为1.83%,证明了该响应面模型具有可靠性。
黄河宁夏段黄河鮈群体的遗传多样性与系统发育分析
王吉祥;刘凯;王永杰;刘彦斌;刘嘉成;王彩雯;肖伟;连总强;王玉涛;为科学评估黄河鮈(Gobio huanghensis)种质资源状况，进一步加强其种质资源保护工作，本研究在连续3年开展黄河宁夏段资源调查的基础上，同期定点采集青铜峡坝上南长滩村、余丁乡和坝下梅家湾村、月牙湖乡、红崖子乡等5个不同地理群体样本，基于线粒体cox1基因序列及生物信息学分析探讨其遗传多样性和系统发育关系。研究结果表明，在长度为1 428 bp的cox1基因序列区域共检测到162个多态位点，界定了26个单倍型；5个群体中除南长滩群体具有“低Hd低Pi”(Hd:0.468;Pi:0.000 62)特点外，其余群体均呈现出“高Hd高Pi”(Hd:0.721～0.840;Pi:0.009 18～0.035 88)的分布特点，且青铜峡坝上与坝下群体间具有显著的遗传分化(P<0.05),尤其南长滩、余丁乡2个群体与月牙湖群体达到了种群分化水平；系统发育分析显示黄河鮈与蛇鮈(Saurogobio dabryi)亲缘关系最近。综上所述，结合历年资源调查结果推测，黄河鮈因青铜峡大坝形成了明显的种群地理阻隔，因此建议将黄河鮈划分为青铜峡坝上与坝下2个地理种群，在加强原地保护的基础上，通过人工繁育、增殖放流等人工干预措施，促进坝上、坝下种质资源基因交流，以有效恢复和保护黄河鮈这一珍贵种质资源。
核桃清蛋白抗氧化肽对力竭运动小鼠抗疲劳和抗氧化能力的影响
邱娟;核桃蛋白是一种具有多种功效的高营养植物蛋白。本研究首先制备了核桃清蛋白抗氧化肽,然后应用不同剂量的核桃清蛋白抗氧化肽灌胃大鼠4周,并用维生素C作为阳性对照,考察了其对力竭运动小鼠抗疲劳和抗氧化能力的影响。研究发现,维生素C和核桃清蛋白抗氧化肽均可显著提高小鼠的游泳力竭时间,且随着核桃清蛋白抗氧化肽溶液浓度的升高,小鼠的力竭时间也随之延长。核桃清蛋白抗氧化肽可以以剂量依赖性方式提高小鼠的肝糖原和游离脂肪酸含量并降低乳酸和尿素氮含量。随着核桃清蛋白抗氧化肽浓度的升高,小鼠的血清肌酸激酶、天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平均逐渐降低。核桃清蛋白抗氧化肽以剂量依赖方式提高小鼠SOD和CAT水平并降低MDA水平。研究证实,核桃清蛋白抗氧化肽具有较好的抗疲劳作用和抗氧化能力,其抗疲劳作用与提高肝糖原储备能力、增加脂肪动员、降低乳酸堆积和蛋白质分解有关。其抗氧化能力与清除自由基和减弱脂质过氧化有关。总之,核桃清蛋白抗氧化肽在营养补充剂方面具有较高的开发和应用前景。
白花除虫菊叶绿体基因组特征及系统发育研究
吕薇;付瀚森;李伽文;刘科新;柏锦学;王彩云;何杰芳;曾拓;白花除虫菊(Tanacetum cinerariifolium)是全球唯一集约化种植的杀虫园艺作物，从其头状花序提取的天然除虫菊酯广泛应用于有机农业和家居害虫防控，具有极高的商业价值。本研究通过Illumina HiSeq 2500测序平台对白花除虫菊叶绿体基因组进行了测序，并对其结构特征及系统进化关系进行了分析。结果表明，白花除虫菊叶绿体基因组为典型的四分体结构，基因组大小为150 171 bp,包括84个蛋白质编码基因、 37个转运RNA基因和8个核糖体RNA基因；密码子偏好性分析发现其叶绿体基因组中密码子末端偏好以A和U结尾，其中亮氨酸的密码子是最常用的，其使用UUA密码子的频率最高，RSCU值为1.88。在其叶绿体基因组中鉴定到简单重复序列(simple sequence repeat, SSR)位点共41个，包含37个单核苷酸重复序列、 4个复合型核苷酸重复序列；基于菊科(Asteraceae)39个叶绿体基因组序列构建的系统发育树表明，其叶绿体基因组高度保守，除近缘红花除虫菊(T.coccineum)外，除虫菊类与同为菊科的植物蒿子杆(Ismelia carinata)亲缘较近。本研究结果能为白花除虫菊分子标记的开发、遗传多样性，以及为进一步研究菊蒿属(Tanacetum)植物的保护生物学和种群遗传学奠定基础。
利用EST数据克隆大豆天冬氨酸代谢途径关键酶基因
于妍;姜威;唐敬仙;刘春燕;刘迎雪;陈立君;陈庆山;胡国华;电子克隆(in silico cloning)是随着基因组计划和EST计划实施而发展起来的利用生物信息学手段进行基因克隆的新方法。本研究根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法以不同物种的基因序列为信息探针,运用Blast软件与所下载的大豆EST数据库进行比对拼接,获得基因全长cDNA序列。首次克隆了大豆天冬氨酸代谢途径上AHRI、AHAS、ASADH、BCAT、CBL、DAPD、DAPE、DHDPR、DHAD、HK和TD等11个关键酶基因的cDNA序列。其中AHRI、DAPD、DAPE、DHDPR和DHAD基因经RT-PCR克隆和序列分析验证,长度分别为1764bp、1467bp、1080bp、1035bp和1806bp,结果与电子克隆序列基本一致。本实验通过与不同物种的这些基因蛋白序列比较,发现与双子叶植物拟南芥、蓖麻和马铃薯的同源性较高,而与单子叶植物水稻的同源性略低。
细胞色素P450介导的果蝇抗药性研究进展
王灵军;叶昌林;郑明辉;黄琳;张露菲;刘晖;于红松;细胞色素P450 (cytochrome P450, CYP450)超基因家族是由一些数量多而功能复杂的血红蛋白酶基因所组成,该代谢酶系作为一种几乎地球上所有需氧生物都存在的重要生存策略,可以调控多种内源物质及外源化合物的代谢,参与了众多重要的生命过程,代谢解毒作用是该酶系重要功能之一。细胞色素P450的代谢解毒作用受药物影响,机体通过改变基因表达量,实现增强代谢解毒,加快机体对于有害物质的代谢,从而使得机体对有害环境产生一定的适应性,进而使得机体产生耐药性或抗药性。本研究说明果蝇细胞色素P450介导的杀虫剂类药物代谢机制及代谢抗性的特点等方面的研究,对明确果蝇的抗药性机制研究具有参考意义。
苔藓NAC基因家族的生物信息学分析
周士钊;罗婷;刘莉;NAC (NAM, ATAF, CUC)转录因子家族仅存在于陆生植物中，在植物发育、响应胁迫以及生物合成过程中发挥重要作用。许多NAC家族成员的功能已被确定(主要在模式植物中),但在苔藓等早期陆生植物中NAC家族的进化过程尚不清楚。本研究从藓类的小立碗藓(Physcomitrella patens)和泥炭藓(Sphagnum fallax)、苔类的地钱(Marchantia polymorpha)和角苔类的角苔(Anthoceros angustus)中，共鉴定出97个NAC基因，并对其进行NAC转录因子家族进化分析。藓类有大约40个NAC基因，地钱和角苔中只有大约10个NAC基因。在苔藓植物中，NAC基因家族可分为5个亚家族。基因结构和保守结构域分析表明，在同一个亚家族中，大多数NAC基因具有相似的基因结构和编码相似的蛋白基序。共线性分析表明NAC-Ⅱ基因位于藓类植物保守共线性区，并随着藓类植物的整个基因重复事件而扩张。上述研究结果表明NAC基因的扩张不仅发生在维管植物中，也发生在苔藓植物中，这对NAC基因家族的功能扩展是至关重要的。进一步研究结果显示，NAC基因家族的扩增时间与藓类植物的全基因组复制(whole genome duplication, WGD)事件密切相关，说明NAC基因家族伴随着全基因复制事件发生扩张。