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紫外分光光度法测定发酵液中L-天冬氨酸
徐礼生;孙玥;柴存宝;彭静;左光秀;聂铭;胡泽群;建立测定发酵液中L-天冬氨酸的一种紫外分光光度测定方法,研究金属离子、反应时间、反应温度等对测定的影响,确定测定的最适条件,L-天冬氨酸溶液与茚三酮显色剂反应显蓝紫色,用紫外分光光度计对L-天冬氨酸反应溶液进行测定,得到最大吸收峰,根据最大吸收峰所对应的波长确定L-天冬氨酸吸光度与浓度间关系曲线。研究表明,L-天冬氨酸最佳吸收波长为510 nm,吸光度与浓度间工作曲线为:Y=0.067 8 X+0.013 5,r2=0.999 5,反应时间和反应温度对检测无影响,其他金属离子均不干扰L-天冬氨酸的测定,紫外分光光度法测定发酵液中L-天冬氨酸的操作简便、快捷、准确。
茉莉酸甲酯对芽期苦荞黄酮积累及相关基因表达的影响
雒晓鹏;朱冬寅;黄云吉;李茂菲;姚攀锋;高飞;李成磊;赵海霞;茉莉酸甲酯(Me JA)是一种新型植物内源激素,该激素可以参与植物黄酮类物质的合成代谢途径。本实验用100μmol/L茉莉酸甲酯溶液对芽期苦荞进行叶面喷施处理,于0~12 h采样。采用Al Cl3法测定处理前后苦荞的总黄酮含量,利用半定量RT-PCR检测苦荞黄酮代谢相关的3个Ft JAZ蛋白基因、3个Ft MYB转录因子以及6个关键酶的基因表达量,并对基因表达量与总黄酮含量进行了相关性分析。结果表明,经茉莉酸甲酯处理后,苦荞芽菜叶片总黄酮含量有所升高,各基因表达模式有所不同,其中Ft JAZ1、Ft JAZ2、Ft JAZ3、Ft MYB2以及Ft PAL基因表达量与总黄酮含量变化趋势相似,而Ft MYB3与Ft F3'H表达量与总黄酮含量变化趋势相反。相关性分析表明,总黄酮含量与Ft MYB2(相关系数为0.864)和Ft JAZ1(相关系数为0.863)显著正相关,与Ft MYB3负相关(相关系数为-0.70),与所有黄酮合成关键酶基因均成正相关。本研究为进一步揭示茉莉酸甲酯参与苦荞黄酮代谢调控的机制奠定了基础。
小鼠超数排卵优化试验方案研究
倪萌萌;赵佳福;段志强;阮涌;陈祥;陈伟;龚婷;谢玲玲;许厚强;探讨建立一种适合贵州地区、高效、稳定的小鼠超数排卵优化方案。在饲养环境相同的基础上,对激素(PMSG, hCG)不同的剂量组合、注射间隔时间、小鼠周龄等影响因素进行了相关研究。试验结果表明:(1)平均采胚数量组间、平均异常胚组间与平均可用胚组间差异显著(p<0.05),注射10 IU的激素剂量组合获得受精卵最多,且异常胚最少,效果最佳。(2)第1、第2、第3组平均采胚数量组间差异显著(p<0.05),第1组与第2组平均可用胚组间差异不显著(p>0.05),但第1、2组与第3组差异显著(p<0.05),异常胚组间差异不显著(p>0.05),选择4周龄超排效果最佳。(3)第1、第2、第3组平均采胚数量、平均可用胚组间差异显著(p<0.05),平均异常胚组间差异不显著(p>0.05),PMSG,hCG间隔注射时间为48 h为最佳。
黑牛肝菌菌丝体生长培养基的响应面优化及其活力评价
方亮;付圣麟;苏广林;詹颖馨;欧小云;刘斌;本研究通过向PDA培养基中添加不同浓度的无机盐和维生素，以菌丝生长速率为指标，以Box-Behnken响应面法对黑牛肝菌(Phlebopus portentosus)野生株PH-21的生长培养基进行了优化，并对不同培养基上生长的菌丝体中的活性代谢物进行了活性评价。结果表明，培养基中无机盐最佳添加量为FeSO4 1.28 mg/mL、CaSO4 1.10 mg/mL和MnSO4 0.81 mg/mL,维生素最佳添加量为VB1 128.5μg/mL、VB2 95.1μg/mL和VB3 94.8μg/mL,菌丝生长的实际值与预测值相符。优化的培养基中生长获得的菌丝体多糖和三萜类化合物含量分别提高了61.4%和53.5%,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除率分别提高了89.2%和44.6%,同时可显著减少细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量，缓解超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化物歧化酶(peroxidase, POD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性的衰减。这些结果表明，在黑牛肝菌的培养过程中，可通过向培养基中添加适宜浓度的无机盐和维生素来提高黑牛肝菌的菌丝生长，减缓菌丝老化速度。
细胞自噬与病毒感染关系的研究进展
宋丽丽;马德慧;王贝贝;张玲艳;王学理;细胞自噬是一种存在于真核细胞内的溶酶体依赖性降解途径,是细胞的一种先天免疫机制。该机制可帮助细胞对破损细胞器进行降解,并将降解后的生物大分子等营养物质重新提供给细胞进行物质的重新利用。病毒侵入宿主细胞后细胞启动自噬系统进行自我吞噬并以此来保护机体将病毒对机体的损害降到最低。但研究发现部分病毒在侵染宿主细胞后也可利用细胞的自噬机制来加速自身在胞内的复制。由此可见病毒与细胞自噬间的相互作用是一个复杂且多向化的过程。为对自噬与病毒感染之间的关系进行更进一步的探究,本综述从自噬的发生机制、自噬的检测方法、自噬与病毒感染的关系、病毒感染与抗肿瘤作用等方面进行了阐述。
饱和与不饱和脂肪酸对巨噬细胞炎症状态的影响
赵亚明;杨邱娴;左玲峰;詹洋;尹亚军;张瑾;选取8种脂肪酸，分别刺激体外培养的小鼠巨噬细胞，再分析炎症标志基因表达的变化，旨在揭示各种脂肪酸对巨噬细胞炎症状态的影响。结果表明，4种饱和脂肪酸棕榈酸(PA)、硬脂酸(SA)、二十二烷酸(BA)和二十四烷酸(LA)均诱发巨噬细胞炎症标志基因TNFα表达上调，细胞呈现炎症状态，PA最显著；4种不饱和脂肪酸棕榈油酸(PO)、花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)均诱发巨噬细胞抗炎症标志基因IL10表达上调，细胞呈现抗炎症状态，DHA最显著；此外，在PA诱导的炎症反应后，添加不饱和脂肪酸能够缓解炎症状态，ARA最显著，DHA次之。Western blot分析发现，PA、LA、ARA和DHA都是通过NF-κB信号通路影响巨噬细胞炎症状态。综上，本研究发现饱和脂肪酸PA、SA、BA和LA能诱发巨噬细胞炎症反应，而不饱和脂肪酸PO、ARA、EPA和DHA能缓解巨噬细胞炎症反应，并且ARA表现最佳。
盐胁迫及外源钙处理对盐肤木种子萌发的影响
王占军;王静;焦小雨;陈延松;徐忠东;欧祖兰;吴席;何子昂;为研究盐肤木种子萌发的盐胁迫机制和外源钙对盐胁迫下种子萌发的影响,实施不同浓度的NaCl、Na_2SO4、CaCl_2+NaCl、CaCl_2+Na_2SO4溶液胁迫处理盐肤木(Rhus chinensis)种子的萌发试验,分析其发芽指标、活力参数和幼苗生长的变化。结果表明:随着盐胁迫溶液NaCl和Na_2SO4浓度的升高,盐肤木种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和幼苗胚芽及胚根长均表现为不同程度减少的趋势,其中100 mmol/L NaCl、75 mmol/L Na_2SO4胁迫对盐肤木种子的萌发及幼苗的生长有显著的抑制作用;同胁迫溶液NaCl相比,盐肤木种子萌发过程中对Na_2SO4危害敏感的浓度范围较小。不同浓度的CaCl2浸种处理时,盐肤木的盐害缓解作用呈现先升高后降低的趋势,30 mmol/L CaCl_2+100 mmol/L Na Cl和15 mmol/L CaCl_2+75 mmol/L Na_2SO4浓度下盐胁迫处理的缓解能力最强。该研究结果有利于缓解盐胁迫对于盐肤木种子萌发的盐害。
小麦3个NAC转录因子基因克隆与功能分析
王凤涛;蔺瑞明;徐世昌;NAC类转录因子参与植物基因在不同条件、不同发育期的表达调控,在植物的发育、生长及对外界的各种生物和非生物因子的胁迫应答中起关键的调控作用。本研究对非亲和条锈菌小种CYR32侵染诱导的抗条锈病基因Yr5近等基因系Taichung29*6/Yr5的cDNA文库进行筛选及同源克隆,获得了小麦3个NAC类转录因子的cDNA序列。序列分析结果表明,这3个转录因子都具有DNA结合结构域,即NAC结构域,且氨基酸序列在该结构域的A、B、C、D和E5个亚区高度保守;同时发现这3个NAC类转录因子都有核定位信号及相关的转录调控功能区域。通过系统进化树分析,发现其中之一的TaNAC1属于NAC转录因子家族第Ⅰ组的NAP亚组,TaNAC3属于ATAF1亚组,TaNAC5属于NAM亚组;根据系统进化树和相关基因的功能分析,我们推测小麦转录因子TaNAC1、TaNAC3和TaNAC5可能参与植物生长发育调控或对生物、非生物胁迫作出的应答反应。
玉米中SBP-box基因家族的生物信息学分析
王维维;单玲玲;芮道晨;SBP-box基因作为植物特有的转录因子,在植物生长发育中起着重要作用。根据已报道的苹果中的SBP-box基因保守域的相关结构,通过生物信息学的相关软件和方法,鉴定并分析玉米基因组中所有SBP-box编码类型基因。对鉴定出的42个基因命名并检测相关属性。利用鉴定出的42个SBP-box基因构建进化树分析该家族基因的相似程度和基因之间的亲缘进化关系,绘制染色体定位图分析每个基因在玉米染色体上的位置。