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个体化护理在糖尿病肾病血液透析患者治疗中的作用
李永秀;陈海燕;为了探讨个体化护理对糖尿病肾病血液透析患者治疗依从性及心血管并发症的影响,本研究选取86例糖尿病肾病血液透析患者随机分为对照组和实验组各43例,对照组给予常规护理,实验组在常规护理基础上给予患者个体化护理。通过比较两组患者的治疗依从性和心血管并发症发生率,本研究发现实验组患者的治疗依从性得分(86.64±8.21)高于对照组(80.34±10.76),差异有统计学意义(p<0.05);第7～12个月实验组患者的低血压、心力衰竭和心律失常发生率低于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。本研究表明,糖尿病肾病血液透析患者的个体化护理能有效地提高患者的依从性,减少心血管并发症的发生。
植物Cation/H+反向转运蛋白研究进展
单喆;张欣欣;高野哲夫;柳参奎;CAX是一种通过质子梯度产生的能量运输协调再分配钙离子(Ca2+)等阳离子的转运蛋白,是Ca2+/Cation antiporter(CaCA)大家族的一个分化枝。植物CAXs属于CAX三大类的Ⅰ型CAX。大部分植物CAXs有11个跨膜区(TM)和5个典型的功能域,即N-端自抑制区域(NRR)、C-端功能区域、Ca2+功能域(CaD)、C功能域和D功能域。其中NRR存在于大部分CAX中,调节CAX的功能。以下综述了近年来国内外对CAX类蛋白的研究成果与进展,涉及到CAX家族的命名,亚家族的分类,CAX组织表达及亚细胞定位,特别是CAX的转运活性等研究。加强对CAX的研究对调节植物生长、提高农作物养分吸收和减轻土壤中污染物等有重要作用。
贝莱斯芽孢杆菌在豆豉发酵中的风味物质及全基因组测序分析
叶桦清;杨林;王筱兰;本研究从曲霉型(Aspergillus)豆豉(Douchi)中筛选分离出一株新的菌株——贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)JXNUWXY23,该菌在豆豉发酵过程中发挥关键作用，能够有效降解纤维素并形成风味物质。为研究菌株JXNUWXY23的代谢机制，对其产生的挥发性风味物质进行气相色谱-质谱联用技术(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)测定，并对其全基因组进行测序分析。GC-MS分析结果表明，豆豉发酵过程中吡嗪类物质含量最多，占69.42%,其中2,3,5,6-四甲基吡嗪是形成豆豉香气的重要化合物。全基因组学分析表明，该菌株全基因组长度为3 993 397 bp,其中共有3 893个基因被编码，与编码碳水化合物活性酶相关的基因有134个。基于GC-MS分析以及基因注释结果，推测贝莱斯芽孢杆菌JXNUWXY23可能通过内切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶将纤维素分解成葡萄糖，这些葡萄糖通过参与糖酵解和TCA循环，转化为风味物质前体，如乙醇、乳酸、乙偶姻以及二磷酸尿苷葡萄糖等。本研究不仅揭示了贝莱斯芽孢杆菌在豆豉发酵过程中的代谢机制，而且为优化豆豉发酵工艺和提升产品品质提供了理论基础。
黑腹果蝇ord基因的原核表达及生物信息学分析
刘焱晖;林先武;颜日辉;黏连蛋白ORD (orientation disruptor)是维持黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)减数分裂姐妹染色单体间黏连与卵母细胞同源重组、联会所必需的。本研究旨在对黑腹果蝇ord基因进行原核表达，并对其表达蛋白进行生物信息学分析。通过PCR扩增出黑腹果蝇ord基因，采用同源重组法构建pET-sumo-ORD重组质粒，经IPTG诱导表达，对表达蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting验证。结果表明，诱导表达的His-ORD融合蛋白大小约为69 kD，为包涵体蛋白。系统发育树分析表明，黑腹果蝇与毛里求斯果蝇(Drosophila mauritiana)、塞舌尔果蝇(Drosophila sechellia)和拟果蝇(Drosophila simulans)的ord基因亲缘关系较近。生物信息学分析表明，ORD蛋白的预测等电点(pI)为5.69，疏水性平均值(GRAVY)为-0.309，属于亲水性蛋白质，其二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。蛋白互作网络分析表明，ORD与INCENP存在相互作用，与CONA、CG13541共同定位。本研究结果为深入研究该基因的功能以及促进减数分裂黏连体研究提供了理论依据和试验基础。
白花蛇舌草诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡
焦凯贺;邵淑丽;陈丽;崔婷婷;张伟伟;冯元;本研究以人胃癌SGC-7901细胞为实验对象,探讨白花蛇舌草对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响。使用台盼蓝拒染法检测人胃癌SGC-7901细胞活性,通过普通光学显微镜、荧光显微镜和共聚焦显微镜,观察细胞的形态结构变化,DNA laddy检测DNA片段,Western blotting检测bax和Bcl-2基因的表达,流式细胞术检测细胞周期及线粒体膜电位。结果显示,在一定浓度范围内白花蛇舌草能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,呈时间和剂量依赖性。24 h、48 h和72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为135.886μg/m L,45.84μg/m L和42.56μg/m L。显微镜下观察到细胞皱缩、核裂变、凋亡小体、细胞核裂解、染色质形态改变等现象,DNA出现片段化,细胞阻滞于G1期,Bax蛋白表达上调、Bcl-2的蛋白表达下调。上述表明白花蛇舌草能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡。
苹果NAC转录因子的克隆与全基因组生物信息学分析
李德龙;周军;王大玮;段安安;高晓宇;段淋渊;本研究利用RACE技术,从"昭锦"栽培种苹果中克隆得到一个长度为1275bp的cDNA序列,包含一个完整开放阅读框,编码255个氨基酸。与GenBank中MdNAC22基因同源,命名为MdNAC。生物信息学分析表明:非编码区包含1个BOX4、2个CAAT-BOX、4个TATA-BOX、1个CCAAT-BOX、1个Skn-1motif和1个ARE,不具有miR164靶序列。相对分子质量为28.87kD,为碱性亲水性蛋白,具有NAC蛋白典型的结构域,无核定位信号和跨膜结构,蛋白质二级结构主要以β-折叠和β-转角为主,三级结构与OsNAC1蛋白类似,但其结构需要进一步优化。系统发育树分析与植物分类学结论大致相符。MdNAC基因定位于16号染色体上。基因芯片表达谱分析表明MdNAC在高温、高盐、低温、外源ABA下都能被显著诱导。这些为进一步进行其功能分析及转基因研究工作奠定了理论基础。
快速康复外科可缓解妇科腹腔镜手术围手术期的镇痛和不良反应
刘静;李彦丽;张靖华;杨会义;为探讨快速康复外科在妇科腹腔镜手术围手术期的应用效果,本研究对2015年5月至2017年6月在本院应用腹腔镜手术治疗的122例患者随机分组,对照组患者应用常规护理,试验组患者实施快速康复外科,观察比较两组患者非切口疼痛持续时间、各时间点视觉模拟评分(visual analogue scale, VAS)、术后恶心呕吐发生率、术后恶心程度视觉模拟评分(visual analogue scale of nausea, NVAS)、胃复安使用率、围手术情况差异。结果表明,试验组患者2 h疼痛比例1.64%、6 h疼痛比例8.20%、24 h疼痛比例3.28%、48 h疼痛比例0.00明显低于对照组(p<0.05);试验组患者手术结束时VAS评分(3.87±1.05)分、术后2 h (3.61±0.87)分、术后6 h (2.34±0.56)分、术后24 h (2.17±0.34)分、术后48 h (0.23±0.09)分明显低于对照组(p<0.05);试验组患者恶心呕吐发生率6.56%、术后NVAS评分(1.21±0.68)分和胃复安使用率4.92%,差异具有统计学意义(p<0.05);试验组患者引流管拔除时间(2.51±0.96) d、术后排气时间(1.42±0.53) d、住院时间(8.51±2.49) d同对照组比较明显下降(p<0.05)。本研究初步表明,针对妇科腹腔镜患者应用快速康复外科可缓解疼痛,降低术后恶心呕吐发生率,提高治疗效果,促进患者康复,值得推广应用。
启动子工程提高海藻糖生产用酶在地衣芽孢杆菌中的表达
陆一鸣;李由然;许银彪;石贵阳;麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose synthase, MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltosyltrehalose hydrolase, MTHase)是酶法合成海藻糖的关键酶。由于该酶系在天然菌种内产量极低，研究者相继在各种模式微生物中对该酶系编码基因进行表达。为了实现MTSase和MTHase在食品安全级菌株的分泌表达，本研究选择重要工业微生物地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)作为宿主菌株，以MTSase为报告蛋白，通过对天然启动子进行筛选，发现PP2介导下MTSase的表达量最高，在此基础上利用启动子工程策略构建了一系列串联启动子及合成启动子，发现合成启动子P1-P2在原有PP2基础上将MTSase的表达量提高了37%,该启动子对于MTHase的表达同样具有提高作用，在P1-P2介导下MTHase的表达量较在PP2介导下的提高了10%。在发酵培养基和P1-P2启动子介导下MTSase和MTHase的酶活力分别可以达到6 907.9 U/mL和798.5 U/mL。
同源片段大小对板栗疫病菌同源重组频率的影响
蓝秀万;陈美佳;周燕;段丹华;陈保善;低毒病毒/板栗疫病菌系统是一个具有独特优点的、崭新的研究病毒与宿主相互作用的模型系统。以同源重组为基础的基因打靶是研究基因功能和病毒与宿主相互作用分子机制的重要手段。为了研究在板栗疫病菌同源重组遗传操作中同源片段大小对同源重组频率的影响,利用一段5.4 kb板栗疫病菌染色体DNA序列,构建了以潮霉素抗性基因为遗传转化筛选标记的3个同源双交换片段以及3个同源单交换质粒,分别转化板栗疫病菌EP155原生质体,检测筛选同源重组转化子并计算发生同源重组频率。结果表明,在板栗疫病菌中3个同源双交换片段FHA1(1.72.0 kb)、FHA2(1.01.2 kb)和FHA3(0.5 kb)的同源重组频率分别为3.73%、2.06%和0;3个同源单交换质粒pFH1(1.76 kb)、pFH2(1.23 kb)和pFH3(0.54 kb)的同源重组频率分别为0.95%、0和0。这些结果为板栗疫病菌同源重组遗传操作中同源片段大小的设计提供了依据。
冠突散囊菌nsdD基因超表达菌株的构建及表型分析
余春芳;熊庆;李文仿;谭玉梅;刘永翔;刘作易;欧琴;为了研究冠突散囊菌nsdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化到冠突散囊菌进行功能验证。结果显示向基因组随机插入外源质粒DNA,随机挑选11个nsd D基因超表达转化子,对nsdD基因超表达转化子菌株培养观察并与野生型菌株相比发现,在5%和17%NaCl培养基中菌落差异不显著,而且仍能产生成熟的有性孢子。本实验为冠突散囊菌有性发育调控机制的研究提供了技术基础。